Preparation method and application of noctilucent flower extract with hypoglycemic activity
附图说明 为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中： 图1为本发明夜香花提取物高效液相图。 技术领域 本发明属于医药技术领域，具体涉及到一种具有降糖活性的夜香花提取物的制备方法及其应用。 具体实施方式 为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。 在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。 其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。 下述实施例中所用的夜香花采自柳州市鱼峰区里雍镇，其它材料如无特殊说明，均为从商业渠道购买得到。 实施例1 夜香花提取物的制备 取新采摘的夜香花花蕾100g，加入200mL蒸馏水，利用匀浆机打成浆状物；在浆状物中加入200mL无水乙醇，移至三口瓶中，于50℃提取2小时；用布氏漏斗负压过滤，去掉残渣，得滤液。减压回收乙醇，得到夜香花浓缩液，再加入500mL 80℃蒸馏水快速搅拌，趁热过滤后将滤液减压浓缩、干燥，即得夜香花提取物11.5g。 实施例2 夜香花提取物的制备 取新采摘的夜香花花蕾100g，加入200mL蒸馏水，利用匀浆机打成浆状物；在浆状物中加入500mL无水乙醇，移至三口瓶中，于80℃提取3小时；用布氏漏斗负压过滤，去掉残渣，得滤液。减压回收乙醇，得到夜香花浓缩液，再加入500mL 80℃蒸馏水快速搅拌，趁热过滤后将滤液减压浓缩、干燥，即得夜香花提取物13.7g。 实施例3 夜香花提取物的制备 取新采摘的夜香花花蕾100g，加入200mL蒸馏水，利用匀浆机打成浆状物；在浆状物中加入800mL无水乙醇，移至三口瓶中，于70℃提取5小时；用布氏漏斗负压过滤，去掉残渣，得滤液。减压回收乙醇，得到夜香花浓缩液，再加入500mL 80℃蒸馏水快速搅拌，趁热过滤后将滤液减压浓缩、干燥，即得夜香花提取物13.4g。 实施例4 夜香花提取物的制备 取采摘后24小时的夜香花花蕾100g，加入200mL蒸馏水，利用匀浆机打成浆状物；在浆状物中加入500mL无水乙醇，移至三口瓶中，于80℃提取3小时；用布氏漏斗负压过滤，去掉残渣，得滤液。减压回收乙醇，得到夜香花浓缩液，再加入500mL 80℃蒸馏水快速搅拌，趁热过滤后将滤液减压浓缩、干燥，即得夜香花提取物12.8g。 实施例5 夜香花提取物的制备 取采摘后48小时的夜香花花蕾100g，加入200mL蒸馏水，利用匀浆机打成浆状物；在浆状物中加入500mL无水乙醇，移至三口瓶中，于70℃提取5小时；用布氏漏斗负压过滤，去掉残渣，得滤液。减压回收乙醇，得到夜香花浓缩液，再加入500mL 80℃蒸馏水快速搅拌，趁热过滤后将滤液减压浓缩、干燥，即得夜香花提取物13.0g。 实施例6 将实施例1-5获得的夜香花提取物作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的药物或保健品的用途的生物活性筛选。 在96孔板中，分别加入不同浓度夜香花提取液和阿卡波糖标准溶液于不同的微孔中，再分别加入0.5U.mL-1α-葡萄糖苷酶40μL，于全波长扫描酶标仪中，在37℃条件下保温10min后，加入30μL 6mmol.L-1底物4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)，再在酶标仪中，于37℃酶解30min后取出，加入90μL 0.2mol.L-1Na2CO3溶液终止反应，每个处理分别做3个重复试验，用酶标仪测定其在405nm波长下的吸光度值A，同时设立空白组和背景组，计算抑制率。其中，空白组为：用磷酸缓冲液替代样品，其测得的吸光度值记为A空白；背景组为：用磷酸缓冲液替代α-葡萄糖苷酶，其测得的吸光度值记为A背景。 α-葡萄糖苷酶活性抑制体系表 计算抑制率，公式如下： 抑制率曲线的绘制：将阳性对照阿卡波糖标准溶液和夜香花提取液分别稀释一定的倍数，按上述条件反应后测吸光度，绘制抑制率曲线，计算IC50值。 结果如下： 结论： 从实验结果表明，通过本发明所述方法获得的夜香花提取物具有抑制α-葡萄糖苷酶的功效。 应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。 背景技术 糖尿病是由胰岛素分泌绝对或相对不足引起的代谢性疾病，其引起的各种并发症已成为影响人类健康的重大公共问题，其中II型糖尿病是由于组织细胞的胰岛素抵抗、细胞功能衰退或其他原因引起，约占糖尿病发病总数的95％以上，其危害程度也最大。α-葡萄糖苷酶是参与人体中碳水化合物代谢的重要酶，通过调整多糖代谢中的关键步骤来维持血糖平衡。食物中的淀粉和蔗糖必须经过小肠绒毛膜上所富含的α-葡萄糖苷酶的分解作用，被水解成葡萄糖和果糖之后才能被人体所吸收。α-葡萄糖苷酶抑制剂可以在小肠上皮细胞刷状缘上与糖类分子可逆性地竞争α-葡萄糖苷酶的结合位点，使多糖和寡糖水解的进程减缓，从而延缓食物中的碳水化合物水解为葡萄糖的进程，使II型糖尿病患者餐后血糖曲线趋于平稳，避免餐后血糖大幅波动对胰腺产生刺激，并改善由于高糖环境造成的外周组织对胰岛素脱敏，对高血糖引发起各种并发症有显著的效预防和改善作用。 临床上常用的α-葡萄糖苷酶抑制剂如阿卡波糖、伏格列波糖等降糖药物易引起肝损伤、腹部绞痛或胃肠不适，如胀气、腹泻等(Derosa G,Maffioli P.α-Glucosidaseinhibitors and their use in clinical practice.Arch Med Sci,2012,8(5):899-906.)。近年来，来源于天然植物的活性成分因其安全、无毒等特点，越来越受到国内外学者的重视，研究发现桑、石斛、葛根、苦瓜、黄连、绞股蓝、熟地黄、山药等提取物均能通过抑制a-葡萄糖苷酶，改善胰岛素抵抗或糖耐量而有效降低糖尿病患者的血糖水平，减轻患者糖尿病症状。 夜香花为萝藦科夜来香属藤本植物，又名夜来香、夜兰香等，是一种蔬菜型药食两用植物，食用部位为其花蕾，因花味芳香，夜间香气尤浓而得名。据《中草药汇编》(第三版，人民卫生出版社，2014年)记载，夜香花有清肝、明目、去翳、拔毒生肌之功效，可治急性结合膜炎，鲜叶外用治渍疮脓肿，外伤糜烂，民间有用果壳煲汤饮服助清目等用。在现有的公开文献中，对夜香花的研究主要集中在其化学成分、精油等方面，尚未见到关于夜香花降糖作用的报道。 发明内容 本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。 鉴于上述和/或现有技术中存在的问题，提出了本发明。 因此，本发明的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种具有降糖活性的夜香花提取物的制备方法。 为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种具有降糖活性的夜香花提取物的制备方法，其特征在于：包括， 取新采摘的夜香花花蕾，加入蒸馏水，利用匀浆机打成浆状物； 在浆状物中加入无水乙醇，移至三口瓶中，并加热提取； 用布氏漏斗负压过滤，去掉残渣，得滤液； 减压回收乙醇，得到夜香花浓缩液； 再加入蒸馏水快速搅拌，趁热过滤后将滤液减压浓缩、干燥，即得夜香花提取物。 作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述夜香花花蕾与蒸馏水的质量比为1：2。 作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述无水乙醇与蒸馏水的添加量的体积比为1～8：1。 作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述加热提取为在50℃-80℃下加热提取2-5小时。 作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述第二次加入蒸馏水，蒸馏水的加入量为500mL，水温为80℃。 作为本发明所述制备方法的一种优选方案，其中：所述夜香花提取物具有抑制α-葡萄糖苷酶的功效。 本发明的再一个目的是，解决现有技术中的问题，提供一种夜香花提取物的应用。 为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：所述夜香花提取物在抑制糖尿病药物筛选靶点α-葡萄糖苷酶中的应用。 作为本发明所述夜香花提取物应用的一种优选方案，其中：所述夜香花提取物在制备治疗降血糖的药物中的用途。 作为本发明所述夜香花提取物应用的一种优选方案，其中：所述夜香花提取物在制备保健品或其他功能性食品中的用途。 本发明有益效果： (1)活性筛选试验证明，本发明提供的夜香花提取物对α-葡萄糖苷酶有显著抑制作用，对α-葡萄糖苷酶抑制活性优于阳性药阿卡波糖。且由于夜香花为蔬菜型药食两用植物，对人体无毒，因此有望开发为一种安全、无毒的降糖药物、保健品或其他功能性食品。 (2)采用本发明所述方法获得的夜香花提取物，能抑制α-葡萄糖苷酶活性，可作为质量控制指标，且生产方法简单易行，适合大规模制备。 The invention discloses a preparation method and application of a noctilucent noctilucent flower extract with hypoglycemic activity, and aims to provide an effective part of noctilucent noctilucent flower with hypoglycemic effect by screening directly aiming at alpha-glucosidase as a target, so as to provide a scientific basis for further development and utilization of noctilucent noctilucent flower resources. An activity screening test proves that the noctilucent noctilucent flower extract provided by the invention has a remarkable inhibition effect on alpha-glucosidase, and the inhibition activity on the alpha-glucosidase is superior to that of a positive drug acarbose. The noctiluca noctiluca is a vegetable type medicinal and edible plant and is non-toxic to human bodies, so that the noctiluca noctiluca is expected to be developed into a safe and non-toxic hypoglycemic drug, health care product or other functional food, the noctiluca noctiluca extract obtained by the method can inhibit the activity of alpha-glucosidase and can be used as a quality control index, the production method is simple and easy to implement, and the noctiluca noctiluca extract is suitable for industrial production. The method is suitable for large-scale preparation. 1.一种具有降糖活性的夜香花提取物的制备方法，其特征在于：包括， 取新采摘的夜香花花蕾，加入蒸馏水，利用匀浆机打成浆状物； 在浆状物中加入无水乙醇，移至三口瓶中，并加热提取； 用布氏漏斗负压过滤，去掉残渣，得滤液； 减压回收乙醇，得到夜香花浓缩液； 再加入蒸馏水快速搅拌，趁热过滤后将滤液减压浓缩、干燥，即得夜香花提取物。 2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述夜香花花蕾与蒸馏水的质量比为1：2。 3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述无水乙醇与蒸馏水的添加量的体积比为1～8：1。 4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述加热提取为在50℃-80℃下加热提取2-5小时。 5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述第二次加入蒸馏水，蒸馏水的加入量为500mL，水温为80℃。 6.如权利要求1～5任一所述的制备方法制得的夜香花提取物，其特征在于：所述夜香花提取物具有抑制α-葡萄糖苷酶的功效。 7.如权利要求6所述的夜香花提取物，其特征在于：所述夜香花提取物在抑制糖尿病药物筛选靶点α-葡萄糖苷酶中的应用。 8.如权利要求6所述的夜香花提取物，其特征在于：所述夜香花提取物在制备治疗降血糖的药物中的用途。 9.如权利要求6所述的夜香花提取物，其特征在于：所述夜香花提取物在制备保健品或其他功能性食品中的用途。