DENTIN BONDING PRETREATMENT COMPOSITION BASED ON MICROENVIRONMENT-INDUCED NANOPARTICLE REDEPOSITION AND USE THEREOF

05-05-2022 дата публикации

Номер:

WO2022088520A1

Автор: LI, Xiaodong, LUO, Qiaojie, Shu, Chang, Xu, Jiajia

Принадлежит: 浙江大学

Контакты:

Номер заявки: CN22-07-202118

Дата заявки: 15-01-2021

基于微环境诱导纳米粒子再沉积的牙本质粘接预处理组合物及用途

技术领域

[1]

本发明属于牙科材料的技术领域，涉及一种基于微环境诱导纳米粒子再沉积的牙本质粘接预处理组合物及用途。

技术背景

[2]

由各种原因导致的牙体缺损是临床最常见的口腔疾病。由于釉质的不可再生性及牙本质自身修复的有限性，目前只能由人工材料恢复重构的牙体组织，恢复其咀嚼、言语、美观等功能。人工材料与牙体组织间由粘接剂粘合，粘接界面的性能与修复体的寿命休戚相关。

[3]

牙本质是在以胶原为主的有机质支架上矿化而成的复合结构，其有机质含量在20％。复杂的结构决定了牙本质粘接的复杂性。牙本质形成过程中，由成牙本质细胞分泌的非胶原蛋白(NCPs)以及金属基质蛋白酶(MMPS)和其他酶类起到了重要的作用。NCPs可通过与胶原纤维结合而对牙本质的矿化起重要的调控作用，并影响磷灰石沉积的速度及其晶体的外形。NCPs含有羧基和磷酸官能团，带大量负电荷，能够结合Ca²⁺、PO₄^3－形成晶核并进而诱导后续的磷灰石结晶矿化过程。然而，非胶原蛋白的性质决定了其在粘接过程中成为不利因素。NCPs的水合能力，使得其粘接过程中形成凝胶结构，严重影响了粘接剂中关键粘接单体的渗入和分布，进而影响粘接的持久性。此外，其强水和能力使得粘接过程中水很难被粘接剂溶剂所取代，导致混合层含水量高、缺陷多，不利于混合层的稳定性。

[4]

脱矿牙本质基质是天然矿化环境，利用这个天然矿化环境快速诱导ACP纳米粒子形成，这些纳米粒子化学结合于脱矿牙本质基质，可以掩盖脱矿牙基质微环境中的电荷，消除NCPs的水化能力，并将脱矿牙本质基质中转化成一种新型的三维有机-无机杂化的结构。仿生矿化后的脱矿牙本质有机质水化能力极大减弱，比表面积增大，界面水分残留减少，提高了与粘接剂关键粘接单体的界面相容性，利于其渗入和均匀分布；牙本质胶原基质中的游离水以及未紧密结合的水分子置换出来有利于形成缺陷更少的杂化层；脱矿牙本质机械强度提高，可以抵抗水挥发时导致的塌陷，从而使牙本质粘接时摆脱对现有湿粘接技术对水的依赖性；此外，机械强度的提高使得混合层这一“复合物”相之间的强度差异减小，减少了应力集中，同样利于粘接界面的稳定性和粘接的持久性；适用于所有现有的牙科粘接剂。

[5]

发明内容

[6]

本发明的目的是提供一种基于微环境诱导纳米粒子再沉积辅助的牙本质粘接预处理组合物，包含二元体系或者三元体系。

[7]

所述二元体系由溶液A和溶液B两种溶液组成，其中溶液A：钙盐溶液；溶液B：磷酸盐溶液。

[8]

二元体系中，溶液A和溶液B在使用前是独立存放的。

[9]

二元体系中，溶液A和溶液B分别可用缓冲液缓冲，溶液的pH5.0～9.0，所用缓冲液包含但不限于Tris-HCl、Hepes等。

[10]

二元体系中，溶液A为可溶性钙盐，包含但不限于氯化钙溶液或硝酸钙溶液或两者的混合溶液，溶液A中的钙离子浓度为0.01mM～1M，优选的，钙离子浓度在1mM～500mM。

[11]

二元体系中，溶液B为可溶性磷酸盐、磷酸一氢盐或磷酸二氢盐，包含但不限于磷酸锂、磷酸一氢锂、磷酸二氢锂、磷酸钠、磷酸一氢钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸一氢钾、磷酸二氢钾溶液、磷酸铵、磷酸一氢胺、磷酸二氢胺，或上述两种及以上溶液的混合溶液，溶液中的磷酸氢根、磷酸二氢根总浓度为0.01mM～1M，优选的，磷酸氢根、磷酸二氢根浓度和在1mM～500mM。

[12]

二元体系中，溶液A中钙离子浓度和溶液B中磷酸根、磷酸氢根、磷酸二氢根浓度总和的摩尔浓度比10：1～1：10。

[13]

二元体系中，溶液A和溶液B使用时体积比10：1～1：10混合，混合后即刻使用。

[14]

本发明的牙科粘接预处理组合物中，在不影响磷酸钙盐沉淀形成的情况下，溶液B中可选的加入抗菌、抑酶等功能性物质中的一种或多种，包含但不限于氟化钠、氯己定、聚六亚甲基双胍或者其盐、卡托普利等，其浓度为0.001mM～1M浓度。

[15]

所述三元体系由溶液A、溶液B、溶液C三种溶液组成，其中溶液A：钙盐溶液；溶液B：磷酸盐溶液；溶液C：可化学吸附于不溶性磷酸钙盐的有机单体试剂。

[16]

三元体系中，溶液A、溶液B、溶液C在使用前是独立存放的。

[17]

三元体系中，溶液A与二元体系中的溶液A范围一致，溶液B与二元体系中的溶液B范围一致。

[18]

三元体系中，溶液A和溶液B分别可用缓冲液缓冲，溶液的pH5.0～9.0，包含但不限于Tris-HCl、Hepes等缓冲液。

[19]

三元体系中，溶液C为可化学吸附于不溶性磷酸钙盐的有机单体试剂溶液，有机单体试剂包含但不限于选用10-甲基丙烯酰氧癸基磷酸酯(10-MDP)、2,4,6三甲基苯基2-[4-(二羟基磷酸基)-2-氧杂丁基]丙烯酸酯(MAEPA)、2-[4-(二羟基磷酰基)-2-氧杂丁基]丙烯酸乙酯(EAEPA)、磷酸正十二烷基二氢酯、磷酸二氢乙酯、4-甲基丙烯酰氧基乙基偏苯三酸(4-MET)、4-甲基丙烯酰氧基偏苯三酸酐(4-META)中的一种或几种，溶液C中的溶剂可以为水、乙醇、丙酮或这几种溶剂的混合物，有机单体试剂的浓度为0.001mM～10M。

[20]

本发明的另一个目的是提供所述基于微环境诱导纳米粒子再沉积的牙本质粘接预处理组合物在制备牙科粘接预处理剂中的应用。

[21]

本发明制备的牙科粘接预处理剂的使用，通过以下方案实现：本发明所述的牙科粘接预处理剂，应用于临床酸处理牙体表面之后、涂布粘接剂之前。

[22]

不管是二元体系还是三元系统预处理组合物，溶液A和溶液B在使用前混合，混合后立刻涂布在牙体表面。

[23]

溶液A和溶液B的混合溶液涂布的时间可为3s～10min，优选的涂布15s～1min。

[24]

混合溶液可以反复涂布多次。涂布的次数可为1～10次，优选的涂布1～3次。

[25]

三元体系牙科粘接预处理组合物，其特征在于，溶液A和溶液B混合后涂布在牙体表面后，水汽冲洗，然后再涂布溶液C。

[26]

溶液C涂布时间可为3s～1min，优选的涂布5s～10s。

[27]

溶液C可以反复涂布多次。涂布的次数可为1次～10次，优选的涂布1～3次。

[28]

使用本发明所述的二元体系或三元体系牙科粘接预处理组合物后，待粘接的牙体表面可保持湿润。

[29]

使用本发明所述的二元体系或三元体系牙科粘接预处理剂后，待涂布粘接剂的牙体表面可干燥。

[30]

本发明所述的二元体系或三元体系牙科粘接预处理剂适用于所有牙科粘接剂。

[31]

通过本发明预处理剂的处理，在脱矿牙本质基质内快速形成与其化学结合的ACP纳米颗粒，消除牙本质有机质的水化能力，改善脱矿牙本质基质相和粘接剂相的界面相容性；提高其机械强度来抵抗水挥发时导致的脱矿牙本质基质塌陷，从而摆脱牙本质粘接时对水的依赖性，降低临床粘接操作的敏感性和由水残留导致的混合层的不稳定性。

[32]

本发明提供的基于微环境快速诱导纳米粒子再沉积的牙本质粘接预处理组合物，是基于脱矿牙本质基质构成的天然矿化诱导环境，快速诱导钙盐溶液和磷酸盐溶液混合后所形成的热力学不稳定的磷酸钙前驱体溶液，在强极性的脱矿牙本质基质内快速形成纳米ACP颗粒，从而形成一种全新的有机/无机杂化的三维复合结构。在这种三维复合结构上进行牙科粘接，适用于口腔所有粘接剂，降低粘接临床操作的技术敏感性，提高粘接强度和粘接持久性。

附图说明

[33]

图1实施例一两种溶液混合后即刻至10min间的吸光度值。

[34]

图2实施例一两种溶液混合后即刻至9min间冷冻透射电镜观图。

[35]

图3实施例一两种溶液混合后即刻至9min间形成的纳米粒子的直径。

[36]

图4扫描电镜观察实施例二至七样品表面形貌图。

[37]

图5扫描电镜观察实施例二至七样品截面形貌图。

[38]

图6实施例二至七样品截面脱矿胶原层厚度。

[39]

图7纳米压痕仪检测实施例二、四、六样品表面硬度。

[40]

图8纳米压痕仪检测实施例二、四、六样品表面弹性模量。

[41]

图9 EDS观察实施例二、四、六样品截面钙、磷元素分布。

[42]

图10透射电镜观察实施例二、四、六胶原形态。

[43]

图11随机光学重建显微镜观察实施例二、四、六胶原与钙的位置关系。

[44]

图12热重分析仪检测实施例十六-十八样品。

[45]

图13实施例十六-十八的红外光谱。

[46]

图14 Single bond 2粘接拉伸结果。

[47]

图15 Spectrum粘接拉伸结果。

[48]

图16 Single bond 2微渗漏结果。

[49]

图17Spectrum微渗漏伸结果。

[50]

图18激光共聚焦显微镜观察Single bond 2混合层中的尼罗红荧光分布和强度。

[51]

图19激光共聚焦显微镜观察Spectrum混合层中的尼罗红荧光分布和强度。

[52]

图20透射电镜观察Single bond 2混合层。

[53]

图21透射电镜观察Spectrum混合层。

具体实施方式

[54]

本发明结合附图和实施例作进一步的说明。本发明的实施例只是为了更好地说明本发明的特征，本发明并不限于这些实施例。

[55]

实施例一

[56]

将Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和5.4mM K₂HPO₄等体积混合。

[57]

实施例二

[58]

牙体表面磷酸酸蚀处理后水汽冲洗，保持湿润。

[59]

实施例三

[60]

牙体表面磷酸酸蚀处理后水汽冲洗，用三枪吹干。

[61]

实施例四

[62]

将Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润。

[63]

实施例五

[64]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，三枪吹干。

[65]

实施例六

[66]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布3min，保持湿润。

[67]

实施例七

[68]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布3min，三枪吹干。

[69]

实施例八

[70]

用分光光度计记录实施例一混合后即刻至混合后10min间的溶液在450nm的吸光度，结果如图1，随时间延长，溶液的吸光度增大。

[71]

实施例九

[72]

用冷冻透射电镜观察记录实施例一混合后即刻至混合后10min间的溶液中纳米颗粒，结果如图2，从观察的时刻开始，溶液中形成球形纳米粒子。

[73]

实施例十

[74]

分析冷冻透射电镜观察记录的纳米颗粒粒径，结果如图3，溶液中的纳米粒子直径随时间增大，纳米粒子的直径在40nm～200nm。

[75]

实施例十二

[76]

将实施例二至七的牙体样品按照扫描电镜样品制备方法脱水，使用扫描电镜观察表面形貌，结果如图4，预处理组合物处理的实施例四至七胶原表面有纳米粒子形成，实施例五、七相比于实施例三胶原网蓬松。

[77]

实施例十三

[78]

将实施例二至七的牙体样品在液氮中脆断后按照扫描电镜样品制备方法脱水，使用扫描电镜观察截面形貌，结果如图5，实施例二、四、六胶原网蓬松，实施例五、七相比于实施例三胶原网蓬松。分析实施例二至七样品截面中胶原网的厚度，结果如图6，预处理组合物处理样品能在干燥情况下保持蓬松的三维网状结构。

[79]

实施例十四

[80]

将实施例二、四、六的牙体样品用纳米压痕仪观察样品表面的强度，预处理组合物处理样品的胶原网硬度(图7)和弹性模量增大(图8)。

[81]

实施例十五

[82]

将实施例二、四、六的牙体样品在液氮中脆断后按照扫描电镜样品制备方法脱水，使用EDS观察截面钙、磷元素分布，结果如图9，预处理组合物处理样品在脱矿牙本质基质的表层有钙、磷元素的峰形成。

[83]

实施例十六

[84]

实施例二、四、六牙体样品按照透射标本制样后，用透射电镜观察胶原形态，结果如图10。

[85]

实施例十五

[86]

实施例二、四、六牙体样品用荧光素分别标记胶原和钙后，置于成像缓冲液中，用随机光学重建显微镜观察，结果如图11，证实钙与胶原共定位。

[87]

实施例十六

[88]

牙本质粉用EDTA全脱矿。

[89]

实施例十七

[90]

将Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，处理全脱矿牙本质粉，处理30s，保持湿润。

[91]

实施例十八

[92]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，处理全脱矿牙本质粉，处理3min，保持湿润。

[93]

实施例十九

[94]

实施例十六-十八样品用热重分析仪检测，以10℃/min升温至1000℃，结果如图12，预处理组合物处理牙本质样品结合水减少。

[95]

实施例二十

[96]

实施例十六-十八样品用红外光谱仪检测，在4000-650cm^-1区域内扫描，结果如图13。

[97]

实施例二十一

[98]

实施例二至五的牙体表面涂布Singlebond 2粘接剂，涂布20s后轻吹5s，光固化灯光照20s，然后在表面分层堆树脂。使用慢速切割仪流水冷却下沿牙体长轴垂直粘接界面方向切割，制备成粘接面1毫米×1毫米树脂-牙体条状样本。将树脂-牙体条分成三份，一份用于即刻微拉伸实验，另两个保存于人工唾液中，保持3个月和12个月后再进行微拉伸实验。用微拉伸测试仪对树脂-牙体样本进行微拉伸测试直至样本断裂，记录样本断裂时微拉伸测试仪测得的载荷。测量样本的界面宽度，并计算样本的单位横截面积微拉伸强度。结果如图14。预处理组合物处理提高了粘接强度和粘接持久性。

[99]

实施例二十二

[100]

在实施例二至五的牙体表面涂布Spectrum粘接剂，涂布20s后轻吹5s，光固化灯光照20s，然后在表面分层堆树脂。使用慢速切割仪流水冷却下沿牙体长轴垂直粘接界面方向切割，制备成粘接面1毫米×1毫米树脂-牙体条状样本。将树脂-牙体条分成三份，一份用于即刻微拉伸实验，另两个保存于人工唾液中，保持3个月和12个月后再进行微拉伸实验。用过微拉伸测试仪对各组树脂-牙体样本进行微拉伸测试直至样本断裂，记录样本断裂时微拉伸测试仪测得的载荷。测量样本的界面宽度，并计算样本的单位横截面积微拉伸强度。结果如图15。预处理组合物处理提高了粘接强度和粘接持久性。

[101]

实施例二十三

[102]

在实施例二至五的牙体表面涂布Singlebond 2粘接剂，涂布20s后轻吹5s，光固化灯光照20s，然后在表面分层堆树脂。使用慢速切割仪流水冷却下沿牙体长轴垂直粘接界面方向切割，制备成粘接面1毫米×1毫米树脂-牙体条状样本。将树脂-牙体条分成三份，一份用于即刻微渗漏实验，另两个保存于人工唾液中，保持3个月和12个月后再进行微渗漏实验。用银氨溶液浸泡样品12小时后，用显影液还原银离子。用扫描显微镜在背散射模式下观察银在混合层的沉积情况。结果如图16，预处理组合物处理组混合层中银沉积少于对照组。

[103]

实施例二十四

[104]

在实施例二至五的牙体表面涂布Spectrum粘接剂，涂布20s后轻吹5s，光固化灯光照 20s，然后在表面分层堆树脂。使用慢速切割仪流水冷却下沿牙体长轴垂直粘接界面方向切割，制备成粘接面1毫米×1毫米树脂-牙体条状样本。将树脂-牙体条分成三份，一份用于即刻微渗漏实验，另两个保存于人工唾液中，保持3个月和12个月后再进行微渗漏实验。用银氨溶液浸泡样品12小时后，用显影液还原银离子。用扫描显微镜在背散射模式下观察银在混合层的沉积情况。结果如图17，预处理组合物处理组混合层中银沉积少于对照组。

[105]

实施例二十五

[106]

在Singlebond 2粘接剂加入尼罗红。在实施例二至五的牙体表面涂布添加了尼罗红的Singlebond 2粘接剂，涂布20s后轻吹5s，光固化灯光照20s，然后在表面堆一层1mm厚树脂。使用慢速切割仪流水冷却下沿牙体长轴垂直粘接界面方向切割，制备成粘接面1毫米厚树脂-牙体片状样本。用激光共聚焦显微镜观察混合层中的荧光分布和强度。结果如图18。预处剂的处理提高了疏水的尼罗红在混合的渗透和均匀分布。

[107]

实施例二十六

[108]

在Spectrum粘接剂加入尼罗红。在实施例二至五的牙体表面涂布添加了尼罗红的Spectrum粘接剂，涂布20s后轻吹5s，光固化灯光照20s，然后在表面堆一层1mm厚树脂。使用慢速切割仪流水冷却下沿牙体长轴垂直粘接界面方向切割，制备成粘接面1毫米厚树脂-牙体片状样本。用激光共聚焦显微镜观察混合层中的荧光分布和强度。结果如图19。预处剂的处理提高了疏水的尼罗红在混合的渗透和均匀分布。

[109]

实施例二十七

[110]

在实施例二至五的牙体表面涂布Singlebond 2粘接剂，涂布20s后轻吹5s，光固化灯光照20s，然后在表面分层堆树脂。按照透射电镜制品方法备成超薄切片，使用透射电镜观察，结果如图20。纳米颗粒在牙体胶原纤维间，与牙体有机基质相互缠绕。

[111]

实施例二十八

[112]

在实施例二至五的牙体表面涂布Spectrum粘接剂，涂布20s后轻吹5s，光固化灯光照20s，然后在表面分层堆树脂。按照透射电镜制品方法备成超薄切片，使用透射电镜观察，结果如图21。纳米颗粒在牙体胶原纤维间，与牙体有机基质相互缠绕。

[113]

实施例二十九

[114]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布10min，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[115]

实施例三十

[116]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布10min，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[117]

实施例三十一

[118]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布3s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[119]

实施例三十二

[120]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布3s，三枪吹干。

[121]

实施例三十三

[122]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面30s，重复涂布上述混合溶液10次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[123]

实施例三十四

[124]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[125]

实施例三十五

[126]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[127]

实施例三十六

[128]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布上述混合溶液10次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[129]

实施例三十七

[130]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布上述混合溶液3次，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[131]

实施例三十八

[132]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[133]

实施例三十九

[134]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[135]

实施例四十

[136]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布上述混合溶液4次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[137]

实施例四十一

[138]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布上述混合溶液4次，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[139]

实施例四十二

[140]

Tris-HCl缓冲的500mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比1：10混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[141]

实施例四十三

[142]

Tris-HCl缓冲的500mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比1：10混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[143]

实施例四十四

[144]

Tris-HCl缓冲的500mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比1：10混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布上述混合溶液3次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[145]

实施例四十五

[146]

Tris-HCl缓冲的500mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比1：10混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布上述混合溶液3次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[147]

实施例四十六

[148]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的500mM K₂HPO₄体积比10：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[149]

实施例四十七

[150]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂和Hepes缓冲的500mM K₂HPO₄体积比10：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[151]

实施例四十八

[152]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的500mM K₂HPO₄体积比10：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布该混合溶液2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[153]

实施例四十九

[154]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的500mM K₂HPO₄体积比10：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布该混合溶液2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[155]

实施例五十

[156]

Tris-HCl缓冲的100mM Ca(NO₃)₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[157]

实施例五十一

[158]

Tris-HCl缓冲的100mM Ca(NO₃)₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[159]

实施例五十二

[160]

Tris-HCl缓冲的100mM Ca(NO₃)₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布该混合溶液2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[161]

实施例五十三

[162]

Tris-HCl缓冲的100mM Ca(NO₃)₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布该混合溶液2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[163]

实施例五十四

[164]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄(溶液B)等混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[165]

实施例五十五

[166]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄(溶液B)等混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[167]

实施例五十六

[168]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄(溶液B)等混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[169]

实施例五十七

[170]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄(溶液B)等混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[171]

实施例五十八

[172]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、50mM Na₂HPO₄的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[173]

实施例五十九

[174]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、50mM Na₂HPO₄的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[175]

实施例六十

[176]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、50mM Na₂HPO₄的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[177]

实施例六十一

[178]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、50mM Na₂HPO₄的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布该混合溶液2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[179]

实施例六十二

[180]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、50mM Na₂HPO₄的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布该混合溶液2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[181]

实施例六十三

[182]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、20mM Na₂HPO₄、30mM NaH₂PO₄(溶液B)的溶液等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[183]

实施例六十四

[184]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、20mM Na₂HPO₄、30mM NaH₂PO₄(溶液B)的溶液等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[185]

实施例六十五

[186]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、

[187]

10mMNaF的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[188]

实施例六十六

[189]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[190]

实施例六十七

[191]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[192]

实施例六十八

[193]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[194]

实施例六十九

[195]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[196]

实施例七十

[197]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[198]

实施例七十一

[199]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[200]

实施例七十二

[201]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[202]

实施例七十三

[203]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[204]

实施例七十四

[205]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[206]

实施例七十五

[207]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[208]

实施例七十六

[209]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[210]

实施例七十七

[211]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[212]

实施例七十八

[213]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[214]

实施例七十九

[215]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布3次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[216]

实施例八十

[217]

[218]

实施例八十一

[219]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[220]

实施例八十二

[221]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[222]

实施例八十三

[223]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[224]

实施例八十四

[225]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[226]

实施例八十五

[227]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[228]

实施例八十六

[229]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[230]

实施例八十七

[231]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[232]

实施例八十八

[233]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[234]

实施例八十九

[235]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[236]

实施例九十

[237]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[238]

实施例九十一

[239]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[240]

实施例九十二

[241]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[242]

实施例九十三

[243]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[244]

实施例九十四

[245]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[246]

实施例九十五

[247]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布3次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[248]

实施例九十六

[249]

[250]

实施例九十七

[251]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[252]

实施例九十八

[253]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[254]

实施例九十九

[255]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[256]

实施例一百

[257]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液和含50mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比1：2，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[258]

实施例一百零一

[259]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比1：2，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[260]

实施例一百零二

[261]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比1：2，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[262]

实施例一百零三

[263]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM卡托普利的溶液体积比1：1，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[264]

实施例一百零四

[265]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、10mM卡托普利的溶液体积比1：1，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[266]

实施例一百零五

[267]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[268]

实施例一百零六

[269]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[270]

实施例一百零七

[271]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[272]

实施例一百零八

[273]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[274]

实施例一百零九

[275]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[276]

实施例一百一十

[277]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[278]

实施例一百一十一

[279]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[280]

实施例一百一十二

[281]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[282]

实施例一百一十三

[283]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[284]

实施例一百一十四

[285]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[286]

实施例一百一十五

[287]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[288]

实施例一百一十六

[289]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[290]

实施例一百一十七

[291]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[292]

实施例一百一十八

[293]

[294]

实施例一百一十九

[295]

[296]

实施例一百二十

[297]

[298]

实施例一百二十一

[299]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布10min，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[300]

实施例一百二十二

[301]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布10min，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[302]

实施例一百二十三

[303]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布3s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[304]

实施例一百二十四

[305]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布3s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[306]

实施例一百二十五

[307]

Tris-HCl缓冲的9mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的5.4mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面30s，重复涂布上述混合溶液10次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[308]

实施例一百二十六

[309]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[310]

实施例一百二十七

[311]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[312]

实施例一百二十八

[313]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布上述混合溶液3次，水汽冲洗后涂布15％

[314]

10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[315]

实施例一百二十九

[316]

[317]

10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[318]

实施例一百三十

[319]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[320]

实施例一百三十一

[321]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[322]

实施例一百三十二

[323]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布上述混合溶液4次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[324]

实施例一百三十三

[325]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布上述混合溶液4次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，三枪吹干，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[326]

实施例一百三十四

[327]

Tris-HCl缓冲的500mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比1：10混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[328]

实施例一百三十五

[329]

Tris-HCl缓冲的500mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比1：10混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[330]

实施例一百三十六

[331]

Tris-HCl缓冲的500mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比1：10混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布上述混合溶液3次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[332]

实施例一百三十七

[333]

Tris-HCl缓冲的500mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄体积比1：10混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布上述混合溶液3次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[334]

实施例一百三十八

[335]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的500mM K₂HPO₄体积比10：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[336]

实施例一百三十九

[337]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂和Hepes缓冲的500mM K₂HPO₄体积比10：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[338]

实施例一百四十

[339]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的500mM K₂HPO₄体积比10：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布该混合溶液2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[340]

实施例一百四十一

[341]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的500mM K₂HPO₄体积比10：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布该混合溶液2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[342]

实施例一百四十二

[343]

Tris-HCl缓冲的100mM Ca(NO₃)₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[344]

实施例一百四十三

[345]

Tris-HCl缓冲的100mM Ca(NO₃)₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[346]

实施例一百四十四

[347]

Tris-HCl缓冲的100mM Ca(NO₃)₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布该混合溶液2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[348]

实施例一百四十五

[349]

Tris-HCl缓冲的100mM Ca(NO₃)₂和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布该混合溶液2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[350]

实施例一百四十六

[351]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄(溶液B)等混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[352]

实施例一百四十七

[353]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄(溶液B)等混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[354]

实施例一百四十八

[355]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄(溶液B)等混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[356]

实施例一百四十九

[357]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的100mM K₂HPO₄(溶液B)等混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[358]

实施例一百五十

[359]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、50mM Na₂HPO₄的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[360]

实施例一百五十一

[361]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、50mM Na₂HPO₄的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[362]

实施例一百五十二

[363]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、50mM Na₂HPO₄的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[364]

实施例一百五十三

[365]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、50mM Na₂HPO₄的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布该混合溶液2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[366]

实施例一百五十四

[367]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、50mM Na₂HPO₄的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，重复涂布该混合溶液2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[368]

实施例一百五十五

[369]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、20mM Na₂HPO₄、30mM NaH₂PO₄(溶液B)的溶液等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[370]

实施例一百五十六

[371]

Hepes缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Hepes缓冲的含10mM K₂HPO₄、20mM Na₂HPO₄、30mM NaH₂PO₄(溶液B)的溶液等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[372]

实施例一百五十七

[373]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、

[374]

10mMNaF的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[375]

实施例一百五十八

[376]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、

[377]

10mMNaF的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[378]

实施例一百五十九

[379]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、

[380]

10mMNaF的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[381]

实施例一百六十

[382]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、 10mMNaF的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[383]

实施例五一百六十一

[384]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[385]

实施例一百六十二

[386]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[387]

实施例一百六十三

[388]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[389]

实施例一百六十四

[390]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[391]

实施例一百六十五

[392]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[393]

实施例一百六十六

[394]

[395]

实施例一百六十七

[396]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[397]

实施例一百六十八

[398]

[399]

实施例一百六十九

[400]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、10mMNaF的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[401]

实施例一百七十

[402]

[403]

实施例一百七十一

[404]

[405]

实施例一百七十二

[406]

[407]

实施例一百七十三

[408]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[409]

实施例一百七十四

[410]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[411]

实施例一百七十五

[412]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[413]

实施例一百七十六

[414]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[415]

实施例一百七十七

[416]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[417]

实施例一百七十八

[418]

[419]

实施例一百七十九

[420]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[421]

实施例一百八十

[422]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[423]

实施例一百八十一

[424]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[425]

实施例一百八十二

[426]

[427]

实施例一百八十三

[428]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[429]

实施例一百八十四

[430]

[431]

实施例一百八十五

[432]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、1mM氯己定的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[433]

实施例一百八十六

[434]

[435]

实施例一百八十七

[436]

[437]

实施例一百八十八

[438]

[439]

实施例一百八十九

[440]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[441]

实施例一百九十

[442]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[443]

实施例一百九十一

[444]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[445]

实施例一百九十二

[446]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液和含50mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比1：2，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[447]

实施例一百九十三

[448]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比1：2，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[449]

实施例一百九十四

[450]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM卡托普利的溶液体积比1：2，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[451]

实施例一百九十五

[452]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM卡托普利的溶液体积比1：1，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[453]

实施例一百九十六

[454]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mM Na₂HPO₄、20mM NaH₂PO₄、10mM卡托普利的溶液体积比1：1，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[455]

实施例一百九十七

[456]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[457]

实施例一百九十八

[458]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布20s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[459]

实施例一百九十九

[460]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，保持湿润，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[461]

实施例二百

[462]

Tris-HCl缓冲的100mM CaCl₂(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含100mM K₂HPO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比2：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布15s，重复涂布5次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[463]

实施例二百零一

[464]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[465]

实施例二百零二

[466]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM NaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[467]

实施例二百零三

[468]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：2混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[469]

实施例二百零四

[470]

[471]

实施例二百零五

[472]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[473]

实施例二百零六

[474]

[475]

实施例二百零七

[476]

Tris-HCl缓冲的含50mM Ca(NO₃)₂、50mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含50mM K₂HPO₄、10mM KH₂PO₄、10mMNaF、10mM卡托普利的溶液(溶液B)体积比1：1混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[477]

实施例二百零八

[478]

[479]

实施例二百零九

[480]

[481]

实施例二百一十

[482]

[483]

实施例二百一十一

[484]

[485]

实施例二百一十二

[486]

[487]

实施例二百一十三

[488]

Tris-HCl缓冲的含5mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含5mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[489]

实施例二百一十四

[490]

Tris-HCl缓冲的含5mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含5mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)30s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[491]

实施例二百一十五

[492]

Tris-HCl缓冲的含5mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含5mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)30s，涂布2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[493]

实施例二百一十六

[494]

Tris-HCl缓冲的含5mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含5mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)30s，涂布2次，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[495]

实施例二百一十七

[496]

Tris-HCl缓冲的含5mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含5mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[497]

实施例二百一十八

[498]

Tris-HCl缓冲的含5mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含5mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)30s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[499]

实施例二百一十九

[500]

Tris-HCl缓冲的含5mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含5mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)30s，涂布2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[501]

实施例二百二十

[502]

Tris-HCl缓冲的含5mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含5mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，涂布2次，水汽冲洗后涂布15％10-MDP乙醇溶液(溶液C)30s，涂布2次，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[503]

实施例二百二十一

[504]

Tris-HCl缓冲的含10mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布5％4-MET乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[505]

实施例二百二十二

[506]

Tris-HCl缓冲的含10mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布10s，重复涂布3次后水汽冲洗，涂布5％4-MET乙醇溶液(溶液C)20s，保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[507]

实施例二百二十三

[508]

Tris-HCl缓冲的含10mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄的溶液(溶液B)等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布10s，重复涂布3次后水汽冲洗，涂布5％4-MET乙醇溶液(溶液C)10s，重复涂布3次后保持湿润，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[509]

实施例二百二十四

[510]

Tris-HCl缓冲的含10mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄的溶液等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布30s，水汽冲洗后涂布5％4-MET乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[511]

实施例二百二十五

[512]

Tris-HCl缓冲的含10mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄的溶液等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布10s，重复涂布3次后水汽冲洗，涂布5％4-MET乙醇溶液(溶液C)20s，吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[513]

实施例二百二十六

[514]

Tris-HCl缓冲的含10mM CaCl₂的溶液(溶液A)和Tris-HCl缓冲的含10mM K₂HPO₄的溶液等体积混合后，涂布于磷酸酸蚀后的牙体表面，涂布10s，重复涂布3次后水汽冲洗，涂布5％4-MET乙醇溶液(溶液C)10s，重复涂布3次后吹干牙面，涂布牙科粘接剂进行粘接。

[1]

A dentin bonding pretreatment composition based on microenvironment-induced nanoparticle redeposition, the composition comprising a binary system or a ternary system. The composition is applied after performing acid etching on dentin and before the use of a bonding agent. Under induction by a natural mineralized environment formed by a demineralized dentin matrix after acid etching, the bonding pretreatment agent can rapidly form a large amount of ACP nanoparticles in polar sites of the demineralized dentin matrix. These chemically bonded inorganic nanoparticles mask the polarity of the demineralized dentin matrix, eliminate the hydratability of a dentin organic matter, and improve the compatibility between a demineralized dentin matrix phase and a bonding agent phase at the bonding interface; in addition, the mechanical strength is improved, and same is resistant to collapses caused by water volatilization, thereby eliminating the dependence on water during dentin bonding and reducing the operation sensitivity during clinical bonding and the instability of a mixed layer caused by water residue. The composition can be prepared as a dental bonding pretreatment agent and is suitable for all bonding agent circumstances in the oral cavity.

基于微环境快速诱导纳米粒子再沉积的牙本质粘接预处理组合物，其特征在于，所述组合物包括二元体系和三元体系，二元体系由溶液A和溶液B组成，三元体系由溶液A、溶液B、溶液C组成。

根据权利要求1所述的预处理组合物，其特征在于，二元体系和三元体系中的溶液A和溶液B范围相同，溶液A：可溶性钙盐溶液，溶液B：可溶性磷酸盐溶液，三元体系中的溶液C：能化学吸附于不溶性磷酸钙盐的有机单体试剂溶液。

根据权利要求2所述的预处理组合物，其特征在于，溶液A和溶液B分别用缓冲液缓冲，溶液的pH值为5.0～9.0，缓冲液为Tris-HCl、Hepes体系。

根据权利要求2所述的预处理组合物，其特征在于，溶液A为可溶性钙盐，选用氯化钙溶液、硝酸钙溶液，或两者的混合溶液，溶液A中的钙离子浓度为0.01mM～1M。

根据权利要求2所述的预处理组合物，其特征在于，溶液B为可溶性磷酸盐溶液。

根据权利要求5所述的可溶性磷酸盐溶液B，其特征在于，选用磷酸锂、磷酸一氢锂、磷酸二氢锂、磷酸钠、磷酸一氢钠、磷酸二氢钠、磷酸钾、磷酸一氢钾、磷酸二氢钾溶液、磷酸铵、磷酸一氢铵、磷酸二氢铵溶液，或上述两种及以上溶液的混合溶液，溶液B中的磷酸根、磷酸氢根、磷酸二氢根浓度为0.01mM～1M。

根据权利要求5所述的可溶性磷酸盐溶液B，其特征在于，包含一种或多种抗菌、抑酶物质的可溶性磷酸盐溶液；磷酸盐溶液范围和权利要求6相同，抗菌、抑酶性物质选用氟化钠、氯己定、聚六亚甲基双胍或者其盐、卡托普利，溶液B中抗菌、抑酶性物质的浓度为0.001mM～1M浓度。

根据权利要求2所述的预处理组合物，其特征在于，溶液C选用10-甲基丙烯酰氧癸基磷酸酯(10-MDP)、2,4,6三甲基苯基2-[4-(二羟基磷酸基)-2-氧杂丁基]丙烯酸酯(MAEPA)、2-[4-(二羟基磷酰基)-2-氧杂丁基]丙烯酸乙酯(EAEPA)、磷酸正十二烷基二氢酯、磷酸二氢乙酯、4-甲基丙烯酰氧基乙基偏苯三酸(4-MET)、4-甲基丙烯酰氧基偏苯三酸酐(4-META)中的一种或几种，溶液C中的溶剂为水、乙醇、丙酮或这几种溶剂的混合物，溶液C中有机单体试剂的为0.001mM～10M浓度。

根据权利要求2所述的预处理组合物，其特征在于，溶液A中钙离子浓度和溶液B中磷酸根、磷酸氢根、磷酸二氢根浓度总和的摩尔比10：1～1：10。

权利要求1或2所述的预处理组合物在制备牙科粘接预处理剂中的应用。

根据权利要求10所述的应用，其特征在于，所述牙科粘接预处理剂中溶液A、溶液B和溶液C单独包装。

根据权利要求10所述的应用，其特征在于，不论二元体系还是三元体系，所述牙科粘接预处理剂中溶液A和溶液B使用时按体积比10：1～1：10混合，混合后即刻涂布于脱矿牙本质表面使用。

根据权利要求10所述的应用，其特征在于，对于三元体系，在溶液A和溶液B混合涂布于脱矿牙本质基质后，水汽冲洗，然后再使用三元体系的溶液C。